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1. 吸附法
優(yōu)點(diǎn)：做作條件溫和、簡便；成本低；載體可反復(fù)使用
不足：對離子強(qiáng)度、pH、溫度等因子敏感，故酶易損漏，且酶轉(zhuǎn)載容量較小

2.共價(jià)偶聯(lián)法
優(yōu)點(diǎn)：載體與酶偶聯(lián)的方法多樣化；固定化的酶非常穩(wěn)定，損漏少
不足：偶聯(lián)試劑對生命組織多有一定毒性；偶聯(lián)條件激烈，易引起酶失效；成本較高

3.交聯(lián)法
優(yōu)點(diǎn)：可用的交聯(lián)試劑多，技術(shù)簡易；穩(wěn)定性較高
不足：交聯(lián)條件較激烈，常出現(xiàn)擴(kuò)散限制，使用有一定難度

4.包埋法
優(yōu)點(diǎn)：可進(jìn)行大量的固定化；包埋膜可選用生物相容材料，并可做成任意大小；膠格包埋用膠可做成所需要的厚度與硬度
不足：僅可用于低分子量的底物，不適用于柱系統(tǒng)，反應(yīng)常受擴(kuò)散限制，不是所有單體材料與溶劑都適用于各種酶

酶固定化后一般穩(wěn)定性增加，易從反應(yīng)系統(tǒng)中分離，且易于控制，能反復(fù)多次使用。便于運(yùn)輸和貯存，有利于自動化生產(chǎn)，但是活性降低，使用范圍減小，技術(shù)還有發(fā)展空間。固定化酶是近十余年發(fā)展起來的酶應(yīng)用技術(shù)，在工業(yè)生產(chǎn)、化學(xué)分析和醫(yī)藥等方面有誘人的應(yīng)用前景。

優(yōu)點(diǎn)：
①固定化酶可重復(fù)使用，使酶的使用效率提高、使用成本降低。
②固定化酶極易與反應(yīng)體系分離，簡化了提純工藝，而且產(chǎn)品收率高、質(zhì)量好。
③在多數(shù)情況下，酶經(jīng)固定化后穩(wěn)定性得到提高。
④固定化酶的催化反應(yīng)過程更易控制。
⑤固定化酶具有一定的機(jī)械強(qiáng)度，可以用攪拌或裝柱的方式作用于底物溶液，便于酶催化反應(yīng)的連續(xù)化和自動化操作。
⑥固定化酶與游離酶相比更適于多酶體系的使用，不僅可利用多酶體系中的協(xié)同效應(yīng)使酶催化反應(yīng)速率大大提高，而且還可以控制反應(yīng)按一定順序進(jìn)行。

缺點(diǎn)：
①固定化可能造成酶的部分失活，酶活力有損失。
②酶催化微環(huán)境的改變可能導(dǎo)致其反應(yīng)動力學(xué)發(fā)生變化。
③固定化酶的使用成本增加，使工廠的初始投資增大、
④固定化酶一般只適用于水溶性的小分子底物，對于大分子底物不適宜。
⑤與完整菌體細(xì)胞相比，固定化酶不適宜于多酶反應(yīng)，特別是需要輔助因子參加的反應(yīng)。
⑥胞內(nèi)酶進(jìn)行固定化時必須經(jīng)過酶的分離純化操作